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QuantiTect Primer Assays

使用SYBR® Green进行两步法和一步法定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 适用于全基因组的预制引物确保结果可靠
  • PCR效率接近100%,可靠的定量检测
  • 灵敏度高、特异性好
  • 宽线性范围内的准确定量检测
  • SYBR Green检测方法可节约时间和成本
QuantiTect Primer Assays是生物信息学验证的全基因组引物对,可在任何PCR仪上进行基于SYBR Green的real-time RT-PCR。引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物的基因。每个QuantiTect Primer Assay包含特定基因的正反引物对,以冻干粉形式提供,经重悬可获得10倍稀释的引物溶液(real-time RT-PCR反应液组分需单独订购)。QuantiTect Primer Assays配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane Kit进行SYBR Green检测,可在real-time RT-PCR中确保高特异性和灵敏度的结果,其表现与探针法检测相当。

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Cat No./ID: 249900
QuantiTect Primer Assay (200)
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For 200 x 50 µl reactions or 400 x 25 µl reactions: 10x QuantiTect Primer Assay (lyophilized) supplied in single tube

QuantiTect Primer Assays适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


Product Details

0
real-time RT-PCR具有高度灵敏性。
使用 [A] QuantiTect Primer Assay和QuantiTect SYBR® Green PCR Kit或者 [B] Supplier AII的基于探针的real-time PCR试剂盒,定量检测人白细胞cDNA (1 ng) 中的MAPK1 (一种蛋白激酶) 和IL6 (一种细胞因子),重复两次。QuantiTect Primer Assay的灵敏度高于基于探针的分析,表现为其CT值较低,且具有高特异性,如图中熔解曲线分析中的单峰所示。
1
real-time RT-PCR具有可重复性。
[A] 使用针对IL8 (一种趋化因子) 的QuantiTect Primer Assay和QuantiFast SYBR® Green PCR Kit分析不同量的白细胞cDNA,重复两次。同时进行无模板对照 (NTC) 反应 (平直曲线)。[B] 熔解曲线分析证明了高PCR特异性。
2
研发real-time RT-PCR试剂时节省时间。
在实验室自行研发RT-PCR试剂时,QuantiTect Primer Assays能够显著节省时间。
Performance

 QuantiTect Primer Assays在很大模板浓度范围内确保高效定量分析RNA转录本(参见"Reproducible real-time RT-PCR"的A部分)。应用QuantiFast SYBR Green Kit或其他QIAGEN SYBR Green试剂盒可确保精确的定量分析。该试剂盒可避免形成PCR人工产物(参见"Reproducible real-time RT-PCR"的B部分)。

配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane SYBR Green Kit(用于两步或一步法RT-PCR的预混液)的分析方法与探针法分析相比,CT值可能更低(参见"Superior sensitivity in real-time RT-PCR")。这得益于试剂盒的高PCR特异性,以及SYBR Green染料与每个PCR产物的多重结合。即使处理低丰度转录本也可进行高灵敏度的定量分析。

Principle
应用QuantiTect Primer Assays无需反复验证real-time RT-PCR引物(参见"Time savings in development of real-time RT-PCR assays")。可用于一步和两步法定量RT-PCR。只需登陆QIAGEN GeneGlobe,选择和订购靶基因的引物对。引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠、果蝇、拟南芥和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane SYBR Green Kit(用于两步或一步法RT-PCR的预混液)能提供可靠的结果。
Procedure

每个QuantiTect Primer Assay包含特定基因的正反引物对,以冻干粉形式提供。在pH8.0的条件下经重悬获得10倍稀释的引物溶液,然后可加入QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane试剂盒提供的预混液,进行SYBR Green法检测。将含有引物的预混液装入PCR反应管或孔板,然后加入单个模板样本。

QuantiTect Primer Assays与表中试剂盒配合使用,可获得可靠的结果。

可与QuantiTect Primer Assays共同使用的两步法和一步法定量RT-PCR试剂盒
两步法qRT-PCR一步法qRT-PCR
QuantiFast SYBR Green PCR Kit QuantiFast SYBR Green RT-PCR Kit
Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit Rotor-Gene SYBR Green RT-PCR Kit
QuantiTect SYBR Green PCR Kit QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit

QuantiTect Primer Assays适用于检测RNA。当无法避免基因组DNA污染时,可使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit或FastLane Cell cDNA Kit制备cDNA。这两种试剂盒在合成cDNA的同时,可去除基因组DNA污染。

命名 

基因的 QuantiTect Primer Assay均以数字命名区分,数字位于产品名中基因符号之后。更多详情请参照GeneGlobe FAQs。

Applications

QuantiTect Primer Assays适用于利用SYBR Green检测技术、一步或两步法定量RT-PCR进行基因表达分析。非常适合于以下应用:

  • 验证siRNA介导的基因沉默
  • 验证微阵列结果
  • 高通量筛查

Specifications

Features
Specifications
应用 Gene expression analysis
检测 SYBR Green I
规格 Lyophylized primer set
可在仪器上用于此应用的试剂盒 QuantiFast SYBR Green PCR or RT-PCR Kit, QuantiTect SYBR Green PCR or RT-PCR Kit
real-time或终点法PCR Real-time
物种 Human, mouse, rat, drosophila arabidopsis, chicken, dog

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