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Vapor-Lock

作为PCR的覆盖物

  • 创新的疏水性、低粘度的PCR封装屏障
  • 保证real-time PCR等应用获得高成功率
  • 无需使用管帽,加快反应体系构建

Vapor-Lock是一种创新的疏水性、低粘度的PCR密封介质。只需10 µl易于吸取的Vapor-Lock就可形成有效的屏障。Vapor-Lock覆盖反应液,可避免蒸发,且无需管盖。与矿物油不同,Vapor-Lock不会污染或抑制PCR反应。

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Cat No./ID: 981611
Vapor-Lock (50 ml)
50 ml Vapor-Lock (10–40 µl/reaction)

Vapor-Lock是Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪的配件。



Product Details

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小反应体积获得成功的扩增结果。
使用人类基因组DNA作为模板,扩增人类的bcl-2原癌基因。总反应体积为5 µl。反应在没盖管盖的0.1 ml Strip Tube中进行,红色表示含有10 µ的Vapor-Lock,蓝色表示不含Vapor-Lock。平行进行了5次实验。通过绿色通道获取数据。说明Vapor-Lock对扩增实验的成功与否十分重要。只有覆盖了Vapor-Lock的样本才能检测到扩增结果(平均CT值为26.23,标准偏差为0.10)。  
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Vapor-Lock的自体荧光最小。
在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上进行反应时,用绿色通道测量荧光量。分别对含有Vapor-Lock(红色)、纯水(蓝色)的管子和空管(绿色)进行了荧光量测量。结果:含有在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上进行反应时,用绿色通道测量荧光量。分别对含有Vapor-Lock的管的荧光量和其他管相似。用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪的其他通道检测,获得结果相似(数据未展示)。
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Vapor-Lock的原理。
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使用Vapor-Lock则不需使用管盖。
在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用质粒DNA作模板进行PCR反应。图中红色表示没有管盖但覆盖有Vapor-Lock的管中反应的CT值。蓝色表示有管盖的管中反应的CT值。反应中含有作模板的质粒DNA,以方块表示,无模板的对照以三角形表示。进行了平行的四次反应,显示出标准偏差。无管盖和有管盖的反应结果相似(平均CT值分别为16.29和16.85)。无模板的对照反应的反应CT值也相似(平均CT值分别为32.30和31.32)。  
Performance

使用Vapor-Lock覆盖反应液无需管盖。在比较CT值的实验中,有管盖的反应与无管盖使用Vapor-Lock覆盖的反应,得到的结果相同(参见"Vapor-Lock eliminates need for tube caps")。

小反应体积(如384孔板中的反应体积)通常重复性不好,而且在很多real-time仪器上都很难成功运行。然而,Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪在运行时可持续离心样本,使反应液保持在管底部(参见"Principle of Vapor-Lock")。处理小反应体积时,避免蒸发非常重要。Vapor-Lock可防止蒸发,已成功用于低至5 µl的反应体系的扩增(参见"Successful amplification using small reaction volumes")。

Principle

进行热循环时,反应液可能蒸发,导致反应体积和反应组分浓度的变化。Vapor-Lock可阻止蒸发,在定量real-time PCR和高分辨率熔解(HRM)等精确应用中保证高成功率。Vapor-Lock的外观和性能像水溶缓冲液。它位于水相上层,在水相的上方形成一层(参见"Principle of Vapor-Lock")。Vapor-Lock低粘度、低比重,允许超过约1 µl体积的液滴轻松穿过Vapor-Lock层,进入下层的水相中。

在联管或多孔孔板中处理众多样本时,需要较长的反应体系构建时间,这增加了样品蒸发的可能性,可能导致实验无法成功。Vapor-Lock完全无需管盖,可加快反应体系构建。Vapor-Lock覆盖样本,防止蒸发,提高结果的可靠性。

与矿物油不同,Vapor-Lock不会污染或抑制PCR反应。Vapor-Lock的背景荧光不超过一个荧光单位(参见"Minimal autofluorescence of Vapor-Lock")。

Vapor-Lock可与QIAgility仪器完全兼容,用于高精确度、自动化的反应体系构建。Vapor-Lock非常适合与Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪配合使用。

Vapor-Lock的规格
特征 详细说明
物理性质 不影响PCR;无已知的污染物,包括DNA、RNA、酶、金属、盐或其他微量元素
纯度 合成的高分子聚合物;疏水、无色、无味和无毒
自发荧光 从紫外到红外都未检测到(激发36–680 nm;发射460–712 nm)
粘性 ≥5 centistoke
水汽压 <1 mm Hg
沸点 >120°C
燃点 <125°C
溶解度 <100 ppb
Procedure

Vapor-Lock可用于手动和自动化反应体系构建。推荐在加入各种反应组分之前向反应管中加入Vapor-Lock。Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪运行时的轻微离心,可使Vapor-Lock和水溶反应组分完全分成两层(如Vapor-Lock在上层,反应混合液在下层)。如果不使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪,我们推荐在循环之前对样本稍加离心。

Applications

Vapor-Lock适合于PCR和HRM应用,包括:

基因表达分析
基因分型
突变筛选

Product Resources

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