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EpiTect Control DNA and Control DNA Set

甲基化分析中用作实验对照
  • 使用便利、经严格质量控制的即用型DNA溶液
  • 亚硫酸氢盐转化的DNA,用于对照实验
  • 适用于各种甲基化分析

EpiTect Control DNAs是即用型、完全甲基化或非甲基化经亚硫酸氢盐转化的DNA,以及未处理的非甲基化基因组DNA,为甲基化分析设立标准可靠的对照反应。甲基化或未甲基化的亚硫酸氢盐转化DNA储存在EB Buffer(10 mM Tris·Cl)中,是浓度为10 ng/μl的即用型溶液。未转化的非甲基化人类对照DNA也储存在EB Buffer(10 mM Tris·Cl)中,是浓度为50 ng/μl的即用型溶液。

Cat No./ID: 59568
EpiTect Control DNA (1000)
Unmethylated human control DNA for 1000 control PCRs
Cat No./ID: 59655
EpiTect Control DNA, methylated (100)
Methylated and bisulfite converted human control DNA for 100 control PCRs
Cat No./ID: 59665
EpiTect Control DNA, unmethlyated (100)
Unmethylated and bisulfite converted human control DNA for 100 control PCRs
Cat No./ID: 59695
EpiTect PCR Control DNA Set (100)
Human control DNA set (containing both bisulfite converted methylated and unmethylated DNA and unconverted unmethylated DNA) for 100 control PCRs
0
Real-time PCR标准品。
将EpiTect Methylated Control DNA和EpiTect Unmethylated Control DNA混合,得到100%、90%、50%、10%和0%的甲基化DNA。使用EpiTect MethyLight Assays对人PITX2基因进行三次重复分析,每个DNA样本取10 ng。结果表明,EpiTect Control DNA可用作未知DNA样本定量的甲基化标准品。
1
HRM定量标准品。
扩增APC基因(结肠腺瘤息肉)启动子区域的CpG岛,使用EpiTect HRM PCR Kit在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上通过HRM甲基化分析确定甲基化程度。EpiTect Control DNA Set中甲基化和未甲基化DNA按不同比例混合,作为分析模板。
2
EpiTect Control DNA Pyrogram。
对MGMT启动子的16个CpG进行完全甲基化(甲基化比率>95%)或完全未甲基化(平均甲基化率0.3%)检测。在PyroMark Q96 ID仪器上对MGMT的PCR产物进行焦磷酸测序,MGMT是参与DNA修复和抗药性的p53相关基因。(数据由Uwe Gerstenmaier, Varionostic GmbH, Ulm提供)。
4
对WBA DNA进行EpiTYPER MALDI-TOF分析。
对未甲基化DNA(UMDNA 1)、甲基化DNA(VIAL A 1)和二者混合物(HTXA 1),在使用EpiTect Whole Bisulfitome Kit扩增前后(WBAUMDNA1, WBAHTXA 1, WBAVIAL A 1)进行MP6位点的甲基化检测。扩增前的甲基化模式与扩增后的DNA非常类似,说明是有扩增的位点全面。(数据由美国Hany Ezzeldin, Mayo Clinic, Rochester提供)。
Performance
EpiTect Control DNAs非常适合作为基于探针的real-time PCR甲基化分析的定量标准(参见"Real-time PCR standards") 和用于HRM甲基化分析(参见"HRM quantification standards")。 
Principle
EpiTect Control DNA Set包含所有为甲基化分析设立标准可靠的对照反应的对照DNA。例如:在甲基化特异性PCR中,对照反应必须确保PCR探针和引物特异性结合甲基化或非甲基化DNA(参见"Use of EpiTect Control DNA in PCR for methylation analysis")。这些反应需要不同浓度的完全被亚硫酸氢盐转化的对照DNA,而这些DNA全部甲基化或全部非甲基化(参见"EpiTect Control DNA Pyrogram"和"EpiTYPER MALDI-TOF analysis of WBA DNA")。此外,混合的对照DNAs可做为定量标准,用于在HRM和基于探针的甲基化实验中确定甲基化水平。 
Procedure
表观遗传学中标准的工作流程

表观遗传学信息不仅在生物和医学研究领域,尤其肿瘤学研究中是非常重要的,而且对干细胞研究和生物学的发展也至关重要。由于缺乏从有限样本中获得可重复数据的标准方法,分析DNA甲基化变化仍是一个难题。配合其新引进的EpiTect溶液,QIAGEN提供标准的分析前和分析溶液,用于从DNA样本收集、稳定和纯化到亚硫酸氢盐转化和real-time或终点PCR甲基化分析或测序(参见"Standardized workflows in epigenetics")。

Applications

EpiTect Control DNAs适用于各种甲基化分析的对照反应,包括:

评估MSP引物的特异性
作为HRM和MethyLight PCR的定量标准
评估MethyLight PCR引物和探针的特异性
确定亚硫酸氢盐转化反应的效率
Features
Specifications
应用 End point Methylation Specific PCR (MSP), real-time methylation specific PCR
浓度 10 ng/µl (1 µg in total) excepted the unmethylated control DNA: 50 ng/µl (10 µg in total)
反应次数 for 1000 control PCRs

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