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RNeasy Midi Kit

从细胞、组织或酵母中纯化至多1 mg总RNA

  • 数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
  • 即用型RNA在各种下游应用中表现良好
  • 中量起始样本,RNA产量稳定
  • 无需酚/氯仿抽提
  • 无需CsCl梯度离心,无需LiCl或乙醇沉淀

RNeasy Midi Kit可从细胞、组织或酵母中快速纯化高品质RNA,使用的硅胶膜RNeasy离心柱的结合能力达1 mg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的稳定组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系可有效的破碎组织。处理更小或更大的样本,可使用RNeasy Micro Kit(离心柱结合能力为45 µg RNA)、RNeasy Mini Kit(离心柱结合能力为100 µg RNA)或RNeasy Maxi Kit(离心柱结合能力为6 mg)。

Cat No./ID: 75144
RNeasy Midi Kit (50)
50 RNeasy Midi Spin Columns, Collection Tubes (15 ml), RNase-free Reagents and Buffers
0
RNeasy Midi实验流程。
使用RNeasy Midi Kit纯化的总RNA具有高质量,适用于多种下游操作。实验方案还包括部分纯化的RNA、体外转录本和酶反应RNA的回收。从真核细胞中分离细胞质RNA需要额外的缓冲液(提供组分)。不提供溶壁酶、酵母裂解酶或玻璃珠(酵母样本需要)。因样本来源的发育阶段、种属和生长条件的不同,从样本中分离的RNA量也各异。由于RNA酶步骤富集的RNA种属>200 nt,因此RNA产量不包括5S rRNA、tRNA或其他低分子量RNA。
2
RNeasy Midi离心柱。
RNeasy Midi Kit中提供RNeasy Midi离心柱。
Performance

RNeasy Midii Kit纯化得到的高品质总RNA适用于多种下游应用(参见"High-quality RNA from a variety of samples")。RNeasy Midi Kit可简单地从动物或人类细胞、动物或人类组织或酵母中纯化总RNA(参见下表)。

RNeasy Midi Kit纯化得到的总RNA产量
来源 起始材料 平均产量 (µg)
动物细胞
LMH 
HeLa 
COS-7 
淋巴细胞 (未受激)

7 x 107
7 x 107
3 x 107
1 x 108
850
1000
950
50
小鼠组织



200 mg
100 mg
200 mg

700
130
600
酵母细胞
S. cerevisiae

2 x 108

450
 
Principle

RNeasy Midi Kit可从中量起始样本中高效纯化RNA。RNeasy技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA纯化技术。RNeasy Kits可纯化得到极高品质的RNA,DNA污染达到最低。

Procedure
RNeasy Midi Kit可从5 x 106–1 x 108个动物或人类细胞、20–250 mg动物或人类组织或2 x 107–5 x 108个酵母细胞中简单的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜(参见"RNeasy Midi spin column")。 RNA(至多1 mg)结合到膜上,污染物被高效洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用,可进行方便的柱上DNase处理,去除残留的DNA。之后可用300–500 µl水洗脱得到高浓度的纯化RNA(参见"RNeasy Midi procedure" )。还有一系列特殊应用的实验方案可选。
Applications

使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1(10 mM Tris·Cl、pH 7.5的溶液中),适用于多种下游应用,包括:

Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
终点式RT-PCR
定量real-time RT-PCR
芯片分析 
Poly A+ RNA筛选
Features
Specifications
应用 PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积 300–500 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Tissue, cells
处理 Manual
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 20–250 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 <1 hour
产量 Varies

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快速启动实验方案 (1)
试剂盒操作手册 (1)

For total RNA isolation from animal cells, animal tissues, bacteria, yeast, whole blood, and for RNA cleanup


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参考文献
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