text.skipToContent text.skipToNavigation

exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit

从血清或血浆样本中高效纯化囊泡RNA
  • 可处理大体积样本,可灵敏检测低丰度转录本
  • 1小时内即可完成囊泡RNA的分离
  • 采用离心柱纯化流程,能够平行处理多个样本
  • 可从血清或血浆中分离miRNA和mRNA
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit采用亲和性膜离心柱,可从exosomes和来自血清或血浆中的其他细胞外微泡中高效分离RNA。Maxi规格的分离柱可处理多达4 ml的大体积样本,因此能够可靠检测低丰度RNA。该试剂盒能够快速、便利的获得结果,十分适用于敏感的下游应用。

Buy Products

Cat No./ID: 76204
Buffer XBP (250 ml)
250 ml Binding Buffer
Cat No./ID: 76214
Buffer XE (45 ml)
45 ml Elution Buffer
Cat No./ID: 77023
exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)
For purification of total exosome-derived RNA from serum/plasma; includes 20 exoEasy columns (10 Maxi, 10 Midi) and 20 RNeasy MinElute spin columns
Cat No./ID: 77044
exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit (50)
For purification of total exosome-derived RNA from up to 1 ml serum/plasma; includes 50 exoEasy Midi columns and 50 RNeasy MinElute spin columns
Cat No./ID: 77064
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50)
For purification of total exosome-derived RNA from up to 4 ml serum/plasma; includes 50 exoEasy Maxi columns and 50 RNeasy MinElute spin columns

exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


Product Details

0
exoEasy膜上结合的囊泡完整,且比超速离心法具有更高纯度。
使用扫描电镜(SEM;20000倍放大倍率)观察并对比:预过滤血浆(0.8 µm)超速离心得到的可溶性沉淀,以及从exoEasy纯化柱洗脱的未裂解洗脱液。两种制备方法的产物都含有囊泡状结构,这些结构的预期大小为50–200 nm(白色箭头,比例尺为200 nm)。超速离心法的产物还含有很多较小的不可识别结构,与细胞外囊泡的预期形状和大小不同。
1
exoRNeasy分离得到血浆中细胞外囊泡的小RNA和大RNA。
使用Bioanalyzer对这两种方法分离的囊泡RNA大小进行分析。对血浆进行预过滤(0.8 µm),去除较大的微粒,之后通过目前常用的超速离心法,或exoRNeasy方法分离囊泡。两种方法之后纯化获得的RNA大小和产量相似。
2
exRNeasy分离获得血浆中的所有mRNA和囊泡miRNA。
采用exRNeasy技术从预过滤的血浆中分离RNA,exoEasy纯化柱的流出液可直接裂解。图示为RT-qPCR实验获得的原始CT值,分离实验重复两次,qPCR实验也重复了两次。

* Arroyo, J.D. et al. (2011) Argonaute2 complexes carry a population of circulating microRNAs independent of vesicles in human plasma. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 108, 5003.
3
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit工作流程——从样本到囊泡到总RNA,只需1小时。
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit从预过滤的血浆中分离囊泡只需20分钟。之后进行总RNA分离,仅需35分钟。从样本到囊泡RNA,仅需1小时!您能够更快获得RNA,将宝贵的时间花在结果解读上。
Performance
exoRNeasy纯化exosomes和其他细胞外微泡与超速离心法相比,不仅速度更快,并且产物纯度更高。扫描电镜显示,虽然这两种纯化技术都能够纯化预期大小的完整的囊泡,但超速离心法的产物还含有很多不符合预期的更小、或其他形状的细胞结构(参见Intact vesicles are eluted from the exoEasy membrane with higher purity compared with ultracentrifugation)。
 
此外,Bioanalyzer分析显示,exoRNeasy和传统超速离心方法分离得到的大RNA和小RNA长度和产量相似(参见exoRNeasy isolates small and large RNAs from extracellular vesicles in plasma)。

通过RT-qPCR实验对exoRNeasy纯化的RNA产物和exoEasy分离柱流出液进行分析,结果显示,exoRNeasy的产物包括血浆中所有mRNA,包括细胞外囊泡的miRNA,且不含细胞(参见exoRNeasy captures all mRNA and vesicle-specific miRNAs in plasma)。
Principle
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit改进了传统的超速离心微泡分离方法,能够在20分钟内快速纯化得到细胞外囊泡。该试剂盒采用Exosome Diagnostics, Inc.公司的技术,通过离心柱和特制缓冲液,从多达4 ml的预过滤血浆中分离exosomes。之后使用QIAGEN miRNeasy技术分离总RNA。整个实验流程,从血清/血浆样本到RNA产物,只需1小时。
Procedure
从细胞外微泡分离RNA的完整实验包括两步:纯化exosomes和分离RNA(参见The exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit workflow — sample to microvesicles to total RNA in just 1 hour)。

在exosomes纯化步骤,预过滤的血浆(不包含大于0.8 μM的微粒)与Buffer XBP混合,加至exoEasay亲和性膜离心柱上,结合到柱上。使用Buffer XWP洗涤结合在膜上的囊泡,之后使用QIAzol裂解。

在RNA分离步骤,在QIAzol洗脱液中加入氯仿,回收水相,将其与乙醇混合。包括miRNA在内的总RNA结合到离心柱上,洗涤三次后洗脱。
Applications
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit高度适用于从血浆或血清样本中的囊泡重分离包括mRNA和miRNA的总RNA。

Product Resources

您无权限查看此资源

试剂盒操作手册 (1)

For purification of total RNA, including miRNA, from exosomes and other extracellular vesicles (EVs) in animal and human plasma and serum


显示更多
参考文献
0
fragment fix placeholder