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FlexiGene DNA Kit

在单管中,从全血、白膜层和培养细胞中纯化基因组DNA

  • 容易处理,无样本混淆的风险
  • 可从0.1–20 ml全血中纯化
  • 可从全血、白膜层和培养细胞中直接纯化
  • 纯化速度快
  • 无需有机提取
FlexiGene体系可通过简单的离心操作从人全血、白膜层和培养细胞中分离高纯度的DNA。FlexiGene DNA Kit包括缓冲液和QIAGEN蛋白酶,可直接在单管中简单的进行纯化。联系Autogen, Inc.,咨询FlexiGene试剂的自动纯化解决方案。
Cat No./ID: 51206
FlexiGene DNA Kit (250)
For isolation of genomic DNA from whole blood, buffy coat, and cultured cells in a single tube with fast kit preparation

FlexiGene DNA Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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FlexiGene DNA制备流程。
第一步是在样本中加入裂解缓冲液。通过离心使细胞核和线粒体沉淀,并重悬于含有QIAGEN Protease的变性缓冲液中。蛋白酶切后,加入异丙醇沉淀DNA,通过离心、70%乙醇冲洗及干燥回收。DNA重悬于水合缓冲液中,可直接用于下游分析或置于–20ºC保存。
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高效的下游PCR分析。
使用不同的DNA模板量扩增单拷贝Hugl基因和线粒体靶点(tRNAlys/ATPase)。各样本分析6次,获得可重复的结果。M:分子量标准。
2
高品质基因组DNA。
从4位供体中采集全血,分离基因组DNA。泳道上方显示了起始血量。C:柠檬酸钠处理的血液;E:EDTA处理的血液;M:分子量标准。
Performance

使用FlexiGene体系纯化的DNA可达150 kb(参见"High-quality genomic DNA")。可用于扩增反应和Southern印迹实验,也可存档(参见"Efficient downstream PCR analysis")。

DNA在单管中通过离心操作,从0.1 – 20 ml(血液)、0.1 – 2 ml(白膜层)或1 – 2 x 106个细胞(培养细胞)中纯化DNA。1小时内处理12个样本。依据样本大小,再水合体积0.2 – 1 ml。

使用FlexiGene系统从不同类型的样本中纯化获得的DNA产量
样品     体积 
DNA 产量(µg)
血液*  
0.3 ml
11–14
血液*  
2.0 ml
75–90
血液*  
10.0 ml
 
380–460
白膜层  
0.5 ml
 
110–130
HeLa细胞  
106 cells
 
25–35
* 全血以正常的白细胞计数(7x106 个细胞/ml)。

Principle

FlexiGene DNA体系可从不同量的全血、白膜层和培养细胞中纯化基因组DNA。纯化过程在单管中进行,费用少,操作简单。纯化的DNA在多种下游应用中表现良好。

Procedure
首先在样本中加入裂解液(参见"FlexiGene DNA procedure")。细胞核和线粒体离心沉于底部,使用包含QIAGEN Protease的变性缓冲液重新悬浮。然后蛋白裂解,加入异丙醇沉淀DNA,离心处理,70%乙醇洗涤和干燥。使用水合缓冲液重新悬浮的DNA可即用于下游分析或–20°C贮存。可从全血、白膜层和培养细胞中获得高产量的DNA。
Applications

FlexiGene DNA Kit纯化的DNA可用于多种下游应用,包括:

  • PCR
  • Southern印迹
  • 存档
Features
Specifications
应用 PCR techniques, restriction digest, Southern blotting, sequencing
洗脱体积 200 µl - 1000 µl
规格 Scalable
主要样本类型 Whole blood, buffy coat, cultured cells
处理 Manual
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Genomic DNA
样本量 100 µl - 20 ml
技术 Single tube precipitation method
每次运行或制备时间 25 - 45 minutes (+ DNA rehydration)
产量 35 µg / ml whole blood

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其他资源 (1)
7 years storage at 2-8°C and -20°C
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补充实验方案 (1)
This protocol is designed for purification of DNA from up to 10 ml clotted blood using the FlexiGene DNA Kit.
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试剂盒操作手册 (1)
For purification of DNA from human whole blood, buffy coat, cultured cells
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参考文献
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